A Plataforma AGente das Águas preconiza a formação de agentes ambientais para o biomonitoramento de rios e gestão participativa das águas, atendendo a legislação vigente (Lei Nacional de Recursos Hídricos, 9433/97). Este artigo tem como objetivo analisar o processo de formação de agentes ambientais que atuam nas áreas de Saúde, Educação e Ambiente, chamados de multiplicadores e advindos de diferentes municípios e instituições parceiras do Comitê de Bacias Hidrográficas Rio Dois Rios, pertencente a região Hidrográfica VII (Região Serrana) do Estado do RJ, gerenciada pela AGEVAP. O curso teórico-prático é focado em metodologias ativas como a Aprendizagem Baseada em Problemas (ABP), contribuindo para que os participantes desenvolvam capacidade crítica e se tornem referência nas soluções de problemas locais. A formação teórica dos multiplicadores de Nova Friburgo, Cordeiro e Cantagalo foi realizada em Ambiente Virtual de Aprendizagem (AVA) no campus virtual da Fiocruz com certificação de qualificação profissional por meio de aulas assíncronas e síncronas, utilizando materiais e dinâmicas interativas com intuito de ampliar os conhecimentos e desenvolver novas habilidades em educação ambiental crítica (EAC) e biomonitoramento participativo. As aulas práticas foram presenciais em oito pontos amostrais de coleta em trechos de rios, estratégicos e de interesse do território. A avaliação foi formativa e qualitativa (aplicabilidade conceitual, engajamento, participação e situações-problemas). Os resultados demostraram que dos 58 interessados, 30 multiplicadores foram formados pela Plataforma. Todos demonstraram aplicação conceitual e habilidade na resolução das situações problemas apresentados. A participação foi maior que 75% tanto nas aulas teóricas quanto práticas. O AVA facilitou o engajamento, a interação e a integração dos agentes multiplicadores, proporcionando novas parcerias. A Plataforma Agente das Águas por meio da formação em EA e biomonitoramento promove empoderamento dos agentes tornando-os chave no processo de gestão participativa das águas, aumentando assim o capital social dos atores envolvidos.